Dosage simultané de la morphine et de son métabolite actif dans les urines : validation d’une méthode à l’Agence Nationale pour la Sécurité Sanitaire de l’Environnement de l’Alimentation du Travail et des Produits de santé (ANSSEAT)

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Résumé

Introduction
La morphine-3-glucuronide est le métabolite actif de la morphine qui intervient principalement dans la manifestation de ses effets secondaires. Traceur majeur de la morphine dans les fluides biologiques, son dosage précis pendant le dépistage et le suivi de l’exposition est donc nécessaires et exigent des méthodes fiables. Ce travail vise donc la mise en place et la validation in situ d’une méthode de dosage simultané de la morphine et son métabolite actif dans les urines afin de renforcer l’expertise de l’ANSSEAT.
Matériel et Méthode
Les échantillons analytiques, ont été préparés à partir d’urine de volontaires non exposés aux morphiniques et extraits sous forme base avec du Dichlorométhane/Isopropanol (98/2) en milieu alcalin.
Les analyses ont été réalisées par CLHP-DAD en mode isocratique, sur une colonne en phase inversée. La validation a suivi les exigences de l’ONUDC et de l’ANSSEAT.
Résultat
Les molécules étaient clairement séparées avec des temps de rétention de 2,81 et 2,56 minutes respectivement pour la morphine et la morphine3-glucuronide, une sélectivité à 1,10 et une résolution à 2,72. La méthode a montré une fidélité, une exactitude, une sélectivité et une robustesse satisfaisantes. Les limites de quantification éprouvées étaient de 125 ng/mL pour la morphine et 102 ng/mL pour la morphine-3-glucuronide.
Conclusion
La méthode validée permet le dosage simultané en routine de la morphine et de son métabolite actif dans les urines. Elle constitue un outil fiable pour le monitorage thérapeutique, l’évaluation des intoxications et la détection de dopage, renforçant ainsi les capacités de l’ANSSEAT en matière de surveillance toxicologique.

Mots-clés

Validation, morphine, morphine-3-glucuronide, HPLC-DAD, dosage